準(zhǔn)備樣本

準(zhǔn)備樣本應(yīng)該遵守代表性，準(zhǔn)確性，迅速性和低溫原則，保證所取樣本具有實(shí)驗(yàn)代表的科學(xué)意義，并能防止樣本在實(shí)驗(yàn)前降解，影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性。

樣品包裝

• 利用鋁箔或進(jìn)口凍存管包裹樣本，用油性記號(hào)筆在其表面標(biāo)明樣本編號(hào)等信息，并且不要與乙醇等有機(jī)溶劑接觸；
• 不要用紗布（樣本易粘附在紗布上）、紙張（低溫凍存易碎）直接包裹樣本；
• 不要用玻璃或密封性不好的容器在液氮中保存樣本（玻璃器皿或密封性不好的容器從液氮中取出后會(huì)發(fā)生爆炸）；
• 樣本包裝不要使用透明膠帶（膠帶在低溫條件下粘性減弱，易掉落）；
• 不要把標(biāo)簽紙或其他紙制的說明性文件放入樣本袋內(nèi)，因?yàn)榧垙堅(jiān)谝旱幸姿椤?

樣本采集與存儲(chǔ)

1. 組織樣本采集后，迅速放入進(jìn)口凍存管中，擰緊后立即放入液氮，再轉(zhuǎn)移到-80℃中保存；
2. 細(xì)胞樣本去除培養(yǎng)液后，經(jīng) Trizol 或 Lysis/Binding Solution 處理后儲(chǔ)存于-80℃冰箱中或干冰運(yùn)輸。在-20℃冰箱中儲(chǔ)存不宜太久；懸浮細(xì)胞按照每 10⁵-10⁷ 個(gè)細(xì)胞加 1ml的TRIzol 的比例加入 TRIzol 試劑，使用移液器 Tip 頭反復(fù)吹打細(xì)胞直至看不見成團(tuán)的細(xì)胞塊；貼壁細(xì)胞按每10cm²（相當(dāng)于六孔板一個(gè)孔或 35mm? 直徑培養(yǎng)皿）細(xì)胞加 1ml的TRIzol的比例加入 TRIzol 試劑 ；Trizol溶解細(xì)胞樣本進(jìn)行RNA提取，Trizol的量最好控制在1.5ml以內(nèi)，超過1.5ml時(shí)一個(gè)提取反應(yīng)體系無法全部提取；
3. 未分離白細(xì)胞的全血樣本操作進(jìn)行RNA水平研究。建議在8小時(shí)之內(nèi)進(jìn)行RNA提取，如果沒有RNA提取條件建議使用 PAXgene 全血采血管（BD）采血和保存；對(duì)于全血樣本，另外一個(gè)快速處理的方式就是將全血樣本直接按照體積1:5（Trizol越多越好）的方式投入到Trizol中，干冰運(yùn)輸就行，注意會(huì)有一定的降解風(fēng)險(xiǎn)，全血樣本需要500ul以上的量；
4. 分離白細(xì)胞的全血樣本操作用于RNA水平研究 。全血樣本建議使用EDTA抗凝管采集， 并反復(fù)顛倒混勻幾次，使血液充分抗凝后，進(jìn)行白細(xì)胞分離處理，并將白細(xì)胞放入Trizol中， 使用移液器Tip頭反復(fù)吹打細(xì)胞，直至看不見成團(tuán)的細(xì)胞塊，使之充分溶解于 TRIzol 中形成清亮不粘稠的液體，并全部轉(zhuǎn)移至標(biāo)記好的進(jìn)口凍存管，干冰運(yùn)輸或保存； ?推薦使用EDTA抗凝管采血，由于肝素會(huì)抑制下游PCR反應(yīng)，嚴(yán)禁使用肝素抗凝管采血；
5. 單細(xì)胞處理及下游的RNA研究， 提前在200μL 的RNase-free平蓋低吸附PCR 管中分裝加入百達(dá)提供的10×Sample Buffer； 細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束后，無菌條件分離出細(xì)胞移至200μL 的含有試劑的RNase-free平蓋低吸附PCR 管中（建議在分離單細(xì)胞時(shí)也設(shè)置自己的陰性對(duì)照，來幫助檢驗(yàn)自身的操作過程和實(shí)驗(yàn)環(huán)境是否有污染）；使用微量移液器輕輕吹打混勻，切勿渦旋；瞬時(shí)離心，將樣品收集至管底；將樣品用液氮速凍成型，或存放于-80℃冰箱中，保證管內(nèi)液體成固態(tài)。注意：細(xì)胞培養(yǎng)和分離過程中使用的培養(yǎng)基和其他試劑的組分可能會(huì)抑制下游的酶促反應(yīng)，因此，請(qǐng)盡量減少不必要的樣品體積，或使用無Ca2+ 、Mg2+的緩沖液漂洗細(xì)胞。

樣本運(yùn)輸

• 干冰運(yùn)輸
  • 所有樣本（除去客戶需要保持活性的樣本）都可以用干冰運(yùn)輸，但用于RNA檢測(cè)的樣本必須使用干冰運(yùn)輸，用于DNA檢測(cè)的樣本可酌情處理；
  • 24 小時(shí)到達(dá)的，干冰數(shù)量不得低于 5 公斤；大于24小時(shí)到達(dá)的，建議保證每天3公斤的干冰數(shù)量。夏季可以適當(dāng)再多增加部分干冰（平時(shí)的 1.5 倍）。
• 冰袋運(yùn)輸（能確保樣本在 24 小時(shí)內(nèi)送達(dá) ）
  • 保存于 RNAlater 中的組織樣本 ；
  • 保存于 TRIzol 中的細(xì)胞樣本或經(jīng)過勻漿的組織樣本；
  • 用于抽提 DNA 的新鮮抗凝全血樣本或其他組織樣本；
  • 溶于乙醇中的樣本或核酸。

快遞寄送

1. 將用離心管儲(chǔ)存的樣品用封口膜密封或直接使用進(jìn)口凍存管儲(chǔ)存樣本，將所有樣本集中保存在一個(gè)或幾個(gè)自封袋/50ml離心管中，自封袋/離心管外標(biāo)記好客戶信息；
2. 請(qǐng)仔細(xì)填寫快遞單，運(yùn)輸蘇州百達(dá)生物科技有限公司，建議順豐快遞郵寄。
3. 收樣地址如下：

收樣地址： 江蘇省蘇州市工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)，生物納米園A5-505

收件人：百達(dá)生物收樣室

電話： 177-0155-8215

郵編：215123