抗體文庫是指采用聚合酶鏈反應等手段在體外獲得成套抗體可變區(qū)輕重鏈基因,將這些基因重組入一定的載體,轉入適當的受體細胞或噬菌體中,這些抗體基因克隆的集合體。從該文庫中能夠表達和篩選出所需的單克隆抗體。目前主要利用噬菌體展示篩選技術或酵母表面展示技術來對抗體文庫進行表達和篩選。
基于高通量測序的抗體文庫測序能夠檢測原始合成的抗體文庫抗體基因組成及各自豐度,用于實驗前的QC工作。在進行抗原篩選后,抗體文庫測序能夠發(fā)現與抗原高親和力結合的抗體序列,并用于下游優(yōu)化合成表達。
抗體文庫測序服務流程
以文庫DNA為起始材料,特異性擴增BCR重鏈和輕鏈可變區(qū), 構建測序文庫并進行高通量測序。采用Illumina MiSeq 300PE平臺, 獲得完整的基因可變區(qū);或采用PacBio三代測序獲得抗體轉錄本全長序列。

抗體文庫測序送樣要求
- DNA 樣品總量: ≥200 ng;菌體樣本:>4ml(對數期);
- 樣本物種包括:人,小鼠,豬,狗,駱駝等IMGI數據庫中已有參考抗體基因的物種。
抗體文庫測序周期和交付結果
- 交付周期:10-15個工作日;
- 測序數據量:重鏈輕鏈各自提供大約0.5-1百萬條測序讀長(0.5-1M),全長三代測序提供5千-1萬條測序讀長序列;
- 交付結果:
- 基本數據QC及統(tǒng)計;
- 比對物種參考抗體基因序列庫并進行統(tǒng)計分析;
- 克隆序列特征注釋: CDR1/2/3, FR1/2/3/4核酸序列,氨基酸序列注釋;
- 樣本克隆群體特征分析:CDR3序列長度分析,VDJ基因頻率統(tǒng)計及V-J基因組合頻率分析;
- 樣本間比較分析:測序飽和度分析,樣本間相關性分析等。
抗體文庫測序服務優(yōu)勢
- 全方位服務,提供從VDJ擴增,建庫,測序和生信分析一站式服務;
- 采用準確的擴增引物體,全面提升可變區(qū)序列檢出;
- 豐富的分析內容,提供可變區(qū)序列,抗體基因,多樣本比較等全方位分析服務;
- 合理的價格及快速的服務周期,幫助客戶提高生產效率。