免疫組庫(kù)是指在任何指定時(shí)間，個(gè)體的循環(huán)系統(tǒng)內(nèi)所有功能多樣性B細(xì)胞和T細(xì)胞的總和，又可以細(xì)分為B細(xì)胞受體庫(kù)（B cell receptor Repertoire），T細(xì)胞受體庫(kù)（Tcell receptor Repertoire）。免疫組庫(kù)測(cè)序（Immune Repertoire sequencing(IR-SEQ)）是以 B/T 淋巴細(xì)胞為研究目標(biāo)，以多重PCR或5’RACE技術(shù)目的擴(kuò)增決定B細(xì)胞受體（BCR）或T細(xì)胞受體（TCR）多樣性的互補(bǔ)決定區(qū)（CDR區(qū)），再結(jié)合高通量測(cè)序技術(shù)以及生物信息學(xué)手段，得到其可變區(qū)（VH），多變區(qū)（DH），結(jié)合區(qū)（JH）和恒定區(qū)（CH）的基因片段序列信息，全面評(píng)估免疫系統(tǒng)的多樣性變化，深入挖掘免疫組庫(kù)與疾病的關(guān)系。
我公司利用RACE（Rapid Amplification of cDNA Ends)技術(shù)和公司特有的免疫組庫(kù)特異擴(kuò)增引物集進(jìn)行可變區(qū)的擴(kuò)增。通過(guò)利用Illumina Miseq測(cè)序平臺(tái)，能夠低成本和短周期的完成序列測(cè)序工作，得到全面準(zhǔn)確的B/T淋巴細(xì)胞可變區(qū)組成及多樣性信息。當(dāng)前，我司提供人，小鼠，豬，狗，駱駝和兔物種的BCR免疫組測(cè)序，及人和小鼠的TCR免疫組庫(kù)測(cè)序。
免疫組庫(kù)測(cè)序服務(wù)流程
以RNA為起始材料，使用RACE法對(duì)BCR重鏈/輕鏈，TCR alpha/beta鏈分別構(gòu)建測(cè)序文庫(kù)，然后采用Illumina MiSeq 300PE平臺(tái)，獲得完整的基因可變區(qū)序列。
免疫組庫(kù)測(cè)序送樣要求
- RNA 樣品總量: ≥2 μg；組織樣本（動(dòng)物）：>300 mg；細(xì)胞樣本：>10萬(wàn)個(gè)；
- 提供樣本來(lái)源的種屬信息 。
免疫組庫(kù)測(cè)序周期和交付結(jié)果
- 交付周期：10-15個(gè)工作日；
- 測(cè)序數(shù)據(jù)量：重鏈輕鏈各自提供大約0.5-1百萬(wàn)條測(cè)序讀長(zhǎng)（0.5-1M)；
- 交付結(jié)果：
- 基本數(shù)據(jù)QC及統(tǒng)計(jì)；
- 比對(duì)物種參考抗體基因序列庫(kù)并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析；
- 克隆序列特征注釋?zhuān)?CDR1/2/3， FR1/2/3/4核酸序列，氨基酸序列注釋?zhuān)?/li>
- 樣本克隆群體特征分析：CDR3序列長(zhǎng)度分析，VDJ基因頻率統(tǒng)計(jì)及V-J基因組合頻率分析；
- 樣本間比較分析：測(cè)序飽和度分析，樣本間相關(guān)性分析等。
免疫組庫(kù)測(cè)序服務(wù)優(yōu)勢(shì)
- 全方位服務(wù)，提供從VDJ擴(kuò)增，建庫(kù)，測(cè)序和生信分析一站式服務(wù)；
- 采用特有的5′ RACE擴(kuò)增技術(shù)，及準(zhǔn)確的擴(kuò)增引物體，全面提升可變區(qū)序列檢出；
- 采用分子標(biāo)簽（UMI)的擴(kuò)增技術(shù)，降低因擴(kuò)增效率不同所引起的豐都差異；
- 豐富的分析內(nèi)容，提供可變區(qū)序列，抗體基因，多樣本比較等全方位分析服務(wù)；
- 合理的價(jià)格及快速的服務(wù)周期，幫助客戶(hù)提高生產(chǎn)效率。
